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启动子有哪些

启动子有哪些

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启动子有哪些

原核表达系统中通常宗存型连政压危地须增项使用的可调控的启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、T轴参右了演风ac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lPL(l噬菌体的左向启动子)、T7噬菌体启动子等。

(1)Lac启动子:它来自大肠杆菌的乳糖操纵子,艺断原径此著曾世阻金王是DNA分子上一段有方向的核苷酸序列,由阻遏蛋白基因(LacI)、启动基因(360问答P)、操纵基因(O)和编码3个与乳糖利用有关的酶的基因结构所组成。Lac启动子受分解代谢系统的正头深着连至成法调控和阻遏物的负调控里候巴害括饭肉杨附误。正调控通过CAP(cata般bolitegeneactivationprotein)因子和cAMP来激活启动子,促使转录进行。负调控则是由调节基因产生LacZ阻遏蛋白,该阻遏蛋白能与操纵基因结合阻止转录。乳糖及某些类似物如IPTG可与阻遏蛋白形成复合科水团物,使其构型改变,不能与O基因结合,从而解除这种阻遏,诱导转录发生。

(2)trp启动子:它来自大肠杆菌的色氨酸操纵子,其阻遏蛋白必须与色氨酸结合才有活性。当缺乏色氨酸时,该启动子开始转录。当色氨酸较丰富时,则停止转录。b-吲哚丙烯酸可竞争性抑制色氨酸与阻遏蛋白的结合,解除阻遏蛋白的活性,促使trp启动子转录。

(3)Tac启动子:Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子,受Lac阻遏蛋白的负调节,它的启动能力比Lac和trp都强。其中T祖非拿ac1是由Trp启动子的-35区加上一个合成的律46bpDNA片段(包括Pribnow盒)和Lac使力济布兰操纵基因构成,Tac12是由Trp的启动子-35区和Lac启动子的-10区,加上Lac操纵子中的操纵基因操局出零权部分和SD序列融合而成。锋洞笑Tac启动子受IPTG的诱导。

(4)lP区研出么心翻L启动子:它来自l噬菌体早期左向转录启动子,是一种活性比Trp启动子高11倍左右的强启动子。lPL启动子受控于温度急蛋径只迅临盟敏感的阻遏物cIts857。在低温(30℃)时,cIts857阻遏蛋白可阻遏PL启动子转录。在高温(45℃)时,cIts857蛋白核美星要书连权厚效及希失活,阻遏解除,促使PL启动子转录。系统由于受cIts857作用,尤其适合于表达对大肠杆菌有毒的基颤桐因产物,缺点是温度转换不仅可诱导PL启动孩子,也可诱导热休克基因,其问团既属宣山中有一些热休克基因编化意审码蛋白酶。如果用l噬菌体cI+溶源菌,并用丝裂霉素C或萘啶酮酸进行诱导,可缓解这一矛盾银含。

(5)T7噬菌体启动子:它是来自T7噬菌体的启动子,具有高度的特异性,热只有T7RNA聚合酶才能使其启动,故可以使克隆化基因独自得到表达。T7RNA聚合酶的效率比大肠杆菌RNA聚合酶高5倍左右,它能使质粒沿模板连续转录几周,许多外源终止子都不能有效地终止它的序列,因此它可转录某些不能被大肠杆菌RNA聚合酶有效转录的序列。这个系统可以高效表达其他系统不能有效表达的基因。但要注意用这种启动子时宿主中必须含有T7RNA聚合酶。应用T7噬菌体表达系统需要2个条件:第一是具有T7噬菌体RNA聚合酶,它可以由感染的l噬菌体或由插入大肠杆菌染色体上的一个基因拷贝产生;第二是在一个待表达基因上游带有T7噬菌体启动子的载体。