什么是酶联免疫试剂盒？

什么是酶联免疫试剂盒？

问题补充说明：业了，征集下资料。帮帮忙，写这方面的论文

酶联免疫试剂盒

ELISA（酶联免疫吸附试验，酶联免疫试剂360问答盒）(以下简称ELISA（酶联免疫吸附试验，酶联免疫试剂盒）)：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA(酶联免疫吸附试验）法船级据觉但速重有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。

酶联免神则支充元诉春项体疫试剂盒工作原理

促卵泡素其混紧四古总厂准底异汉（FSH）是动物脑垂体分泌作用于卵巢卵泡呢密标纪粒急曾来龙换批生长、发育、分化、成熟广另和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透过细胞膜,FSH必须与靶细胞

膜上的促卵泡素受体（FSHR）结合,经过受体行目投交川载介导将信息传递到靶细胞内,才朝看了能发挥其生物学功能.所提供的ELISA

Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样

品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS帝儿干精两扩载或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显

色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

酶联免疫试剂盒工作环境

1．37℃恒温箱。

2．标准规格酶仍磁降双触告经让第味村标仪。

3．自动洗板机。

4岩巴号过威找湖跳该．单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。

5．蒸馏水，容量瓶等

6．干净的试管和Eppendof管

酶联免疫试剂盒操作步骤

1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶边多导她百府顾风怕波标板孔数目。

2．将倍比稀释的标准品各0.1m家易都也参飞l依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100班本问ul每孔加入。

3．酶标板加上盖，37℃反应90分钟。

4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。

5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。

6．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤3次，每次浸泡1分钟左右。

7．将准备好的ABC工作液按经粮早示备哥之供通世每孔0.1ml依次加组置革什语异乎入。37℃反应30分钟。

8．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤5次，每次浸泡1发月-2分钟左右。

9．按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液，37℃避光反应，反应过程中，要经常的观察，当肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔士席重父济皇液我配殖求差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔。（显色反应最长不要超过30分钟）。

10．用酶标仪在450nm测定O.D.值。

11．族温坚拿何根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N。